☰ Mundarija · Biologiya

Fermentlar va rekombinant DNK

Darslar 30–31 · 2 ta dars · A. G‘afurov, A. Abdukarimov, J. Tolipova, O. Ishankulov, M. Umaraliyeva, I. Abdurahmonova. Biologiya, 10-sinf, 1-nashr. «Sharq» nashriyot-matbaa aksiyadorlik kompaniyasi, Toshkent, 2017
30

Gen muhandisligida qo‘llaniladigan fermentlar

Darslik: 131–133-betlar
MaqsadGen muhandisligi fermentlari – polimeraza, revertaza, ligaza va restriktazalarning vazifasini tushuntirish.
Yangi so‘zlar
restriktaza · restriction enzymeligaza · ligaserevertaza · reverse transcriptaserestriksiya sayti · restriction site
Tushuntirish

Gen muhandisligida DNKni kesadigan, ulaydigan va nusxalaydigan fermentlar ishlatiladi. DNK polimeraza (1950-yillarda A. Kornberg E. coli dan ajratgan) komplementar nukleotidlarni biriktirib yangi DNK zanjirini sintez qiladi. Revertaza (teskari transkriptaza) – ba’zi RNK-viruslar fermenti – RNK matritsasida komplementar DNK (kDNK) sintez qiladi; shu orqali i-RNKdan gen nusxasi olinadi. DNK ligaza qo‘shni nukleotidlar orasidagi fosfodiefir bog‘larini hosil qilib, DNK bo‘laklarini bir-biriga tikadi. Restriktazalar (restriksion endonukleazalar) DNKning o‘zi tanigan 4–6 nukleotidli maxsus ketma-ketligini – restriksiya saytini – topib, shu joyidan kesadi. Bakteriyalarda ular yot DNK (masalan, virus DNKsi) dan himoya vazifasini bajargan. Restriktazalar yopishqoq uchli (EcoRI) yoki to‘mtoq uchli (HpaI) bo‘laklar hosil qiladi; yopishqoq uchlar komplementar bo‘lgani uchun turli DNK bo‘laklari oson birikadi. Fermentlar nomi ular ajratib olingan bakteriya nomidan olinadi: EcoRI – Escherichia coli. Kesilgan bo‘laklar elektroforez bilan uzunligi bo‘yicha ajratiladi.

Namunalar
EcoRI saytni G↓AATTC bo‘yicha taniydi. Agar DNKda bu ketma-ketlik 3 joyda uchrasa, chiziqli molekula 3 marta kesilib 4 bo‘lakka bo‘linadi; halqasimon plazmida esa 1 saytda kesilsa, ochilib bitta chiziqli bo‘lakka aylanadi.
Elektroforezda DNK manfiy zaryadli bo‘lgani uchun musbat qutbga qarab siljiydi; kichik bo‘laklar tezroq, katta bo‘laklar sekinroq harakatlanadi, shuning uchun gelda bo‘laklar uzunligi bo‘yicha ajraladi.
Sinfda faoliyat

«Fermentlar – ish qurollari»: kartochkalarda ferment nomlari va vazifalari (qaychi, yelim, nusxa ko‘chirgich) aralash beriladi, juftlanadi.

Mashq
1
Restriktaza va ligaza vazifalarini farqlang.
2
Chiziqli DNKda restriksiya sayti 5 joyda bo‘lsa, kesilgandan keyin nechta bo‘lak hosil bo‘ladi? (Faqat son.)
3
Revertaza nima qiladi va u nega kerak?
4
Nega yopishqoq uchlar DNK bo‘laklarini ulashni osonlashtiradi?